Från varroabekämpning till avel av honungsbin

Förord

Varroa destructor på en puppa av Apis mellifera i en täckt cell. Kvalstret förökar sig i täckt yngel

Avel av Apis mellifera för motståndskraft mot Varroa destructor är ett lovande sätt att göra biodlingen mer hållbar och stegvis minska beroendet av kemisk bekämpning. Motståndskraften bygger på ett samspel mellan beteendemässiga, fysiologiska, genetiska och sociala mekanismer. Dit hör allmänt hygienbeteende (HYG), varroakänsligt hygienbeteende (VSH), utebliven kvalsterreproduktion (MNR), återförslutning av yngelceller och putsbeteende.

Artikeln undersöker egenskapernas genetiska och beteendemässiga grund. Den behandlar kvantitativa egenskapsloci (QTL), kandidatgener, samhällets sociala struktur och fädernelinjer, arvbarhet, testernas repeterbarhet och metoder för fenotypning. Bland metoderna finns nåltestet, testet med frysdödat yngel, VSH-testet och Harbotestet. Artikeln jämför också studier av olika storlek, från minst 100 samhällen i standardkupor av typen Dadant eller Langstroth till försök med avläggare eller mindre urval.

Forskningen visar att avel för motståndskraft mot Varroa kan kombineras med urval för honungsproduktion, vårutveckling, övervintring och foglighet. Pol-line, en avelspopulation av Apis mellifera som utvecklades i USA för större motståndskraft mot Varroa destructor och för att bevara egenskaper som är viktiga i yrkesbiodlingen, är ett exempel från produktionsnära förhållanden. I en longitudinell studie av 366 samhällen i Langstrothkupor med tio ramar var överlevnaden signifikant högre i den selekterade populationen. Bland de överlevande samhällena minskade honungsproduktionen inte signifikant [1]. I ett kanadensiskt avelsprogram med 604 samhällen över åtta generationer visade det sig att angrepp av Varroa, vårutveckling, honungsproduktion, vinterförbrukning och hygienbeteende har en genetisk komponent som kan påverkas genom urval. Egenskaperna kan ingå i samma avelsindex [2].

I praktiken bör VSH ingå som en prioriterad hälsoegenskap i ett avelsindex med flera egenskaper. Yrkesbiodlingen behöver populationer med hög och stabil motståndskraft mot Varroa i kombination med hög avkastning, foglighet, låg svärmbenägenhet, god utveckling, lång livslängd och anpassning till lokala förhållanden.

1. Inledning: från bekämpning av Varroa till avel av värddjuret

Varroa destructor är en av de främsta orsakerna till förluster i odlade samhällen av Apis mellifera världen över. Kvalstret livnär sig på värdens vävnader, särskilt fettkroppen, och stör dess fysiologi. Det bidrar även till spridning och förökning av virus, vilket påverkar hälsan hos såväl enskilda bin som hela samhällen [3].

Konventionell bekämpning riktar sig direkt mot parasiten med akaricider, biotekniska metoder eller båda. Avel förändrar i stället värdens mottaglighet över flera generationer.

Ett realistiskt avelsmål är att bromsa tillväxten hos Varroa. Om antalet kvalster ökar tillräckligt långsamt kan samhället fortsätta fungera under en stor del av året.

Mondet med flera fann i sin systematiska översikt att överlevnad vid angrepp av Varroa hänger samman med flera fenotypiska och genomiska mekanismer [4].

En första princip är därför:

varroaresistens är en komplex egenskap hos samhället som inte kan beskrivas med en enda gen eller ett enda test.

2. Individuell och social immunitet

Honungsbiets försvar mot smittämnen kan delas in i två huvudgrupper:

1. individuella försvarsmekanismer;

2. sociala försvarsmekanismer.

Till den senare gruppen hör beteenden där arbetarna känner igen och avlägsnar infekterade, parasiterade eller döda individer. Hygienbeteende är därför en form av social immunitet.

En arbetare kan:

• upptäcka en avvikelse;

• lokalisera cellen;

• öppna täcklocket;

• avlägsna puppan eller larven;

• bära bort materialet.

Vid angrepp av Varroa är förloppet särskilt komplext eftersom arbetaren måste uppfatta signaler som hänger samman med kvalstrets närvaro och fortplantning.

3. HYG: allmänt hygienbeteende

Hygienbeteende (HYG) är arbetarnas förmåga att upptäcka och avlägsna dött, sjukt eller på annat sätt avvikande yngel. Fenotypen har två huvudsakliga delar: upptäckt och öppning av cellen samt borttagning av ynglet.

Hygienbeteende (HYG) är arbetarnas förmåga att upptäcka och avlägsna dött, sjukt eller på annat sätt avvikande yngel

Rothenbuhler föreslog först en relativt enkel modell där olika genetiska faktorer styr öppningen och borttagningen. Senare kvantitativa studier visade att den genetiska strukturen är betydligt mer komplex.

Lapidge, Oldroyd och Spivak fann tecken på sju QTL kopplade till hygienbeteendet. Varje region förklarade en begränsad andel av variationen i den undersökta populationen [5].

Oxley, Spivak och Oldroyd identifierade senare sex QTL som var förknippade med den tröskel vid vilken en arbetare börjar visa hygienbeteende [6].

Resultaten tyder på att fenotypen uppstår genom samspelet mellan flera genomregioner och särskilt beror på hur de uttrycks i samhällets sociala miljö.

4. VSH: en specialiserad form av hygienbeteende

Varroakänsligt hygienbeteende (VSH) innebär att arbetarna företrädesvis känner igen yngel som angripits av Varroa och avlägsnar det. Skillnaden mot allmänt hygienbeteende är viktig. Det vanliga HYG-testet ställer frågan:

”Hur snabbt upptäcker och avlägsnar samhället en död puppa?”

Försöksupplägg för att bedöma VSH-svaret på celler med varroakvalster och på olika signaler som är förknippade med kvalstrets närvaro

VSH-testet ställer en annan fråga:

”Hur effektivt upptäcker och avlägsnar samhället yngel med varroakvalster, särskilt när kvalstret förökar sig?”

Tsuruda med flera identifierade genomregioner kopplade till VSH, däribland ett QTL på kromosom 9 [7]. Dessa områden innehåller kandidatgener som är kopplade till sinnesförnimmelse och bearbetning av signaler.

De identifierade regionerna förklarar bara en del av variationen. Egenskapen har överlag en polygen grund.

5. Kandidatgener: luktsinne, nervsystem och beteende

En del av VSH-forskningen rör kemisk perception. Mondet med flera jämförde antennernas transkriptom hos bin som visade VSH med motsvarande transkriptom hos bin som inte visade beteendet [8].

Resultaten tyder på att antennerna är centrala för att uppfatta signaler från angripet yngel. VSH-binas profil liknade ambinas mer än samlarbinas. Det stämmer överens med att beteendet främst uttrycks av arbetare med uppgifter inne i boet.

Bland de studerade gengrupperna och kandidaterna finns:

• OBP, luktämnesbindande proteiner;

• luktreceptorer;

• CSP, kemosensoriska proteiner;

• nanchung;

• dopaminerga signalvägar;

• Dscam;

• gener som medverkar i nervcellers utveckling och sammankoppling.

Dscam är särskilt intressant. En genomvid associationsstudie (GWAS) av 155 samhällen av A. m. mellifera från Frankrike och Schweiz identifierade två QTL som var signifikant kopplade till återförslutning av yngelceller angripna av Varroa. Det ena låg i en intron i Dscam, en gen som medverkar i nervcellernas sammankoppling [9].

Sammantaget tyder resultaten på att beteendemässig motståndskraft bygger på flera sammanlänkade processer:

perception → neuronal bearbetning → inlärning och beteendetrösklar → social respons.

6. SMR, MNR och VSH: tre olika begrepp

Begreppen SMR, MNR och VSH blandas ofta ihop i vetenskapliga och tekniska publikationer.

SMR – Suppressed Mite Reproduction (hämmad kvalsterreproduktion)

Begreppet användes om samhällen där en mycket stor andel av kvalstren i ynglet inte förökade sig. Harbo och Harris visade senare att de vuxna binas beteende förklarade en betydande del av fenomenet [10]. I ett försök flyttades kakor med nyss täckt, naturligt angripet yngel till SMR-samhällen och kontrollsamhällen. Efter åtta dagar hade SMR-samhällena en betydligt lägre andel angripna celler. Även andelen reproducerande kvalster bland de kvarvarande kvalstren var mycket lägre [10].

MNR – Mite Non-Reproduction (utebliven kvalsterreproduktion)

MNR syftar på kvalstrets observerade fenotyp, det vill säga att det inte förökar sig.

VSH

VSH beskriver binas beteende.

Sammanfattning:

VSH = en beteendeegenskap hos bina

MNR = ett observerbart utfall i kvalstrets fortplantningscykel

SMR = en historisk beteckning för fenotypen och den ursprungliga urvalsmetoden

Skillnaden är viktig eftersom utebliven fortplantning kan ha flera orsaker. Den visar inte i sig att bina har VSH [4,10].

7. Samhället som genetisk och social enhet

En egenskap hos honungsbiets genetik skiljer aveln från avel hos många andra husdjur. Drottningen parar sig vanligen med många drönare. Samhället omfattar därför flera fädernelinjer. Arbetarna har samma mor men kan ha olika fäder. Ett samhälle innehåller därmed flera genotyper.

Samhällets VSH-fenotyp beror på hur stor andel av arbetarna som har anlag för beteendet och hur de samverkar. Aveln behöver därför ta hänsyn till båda föräldralinjerna. Drottningen bidrar med en betydande del av samhällets genetiska potential, och drönarna som är fäder till hennes avkomma påverkar också fenotypen.

I praktiken:

en drottning från en linje med hög VSH kan ge ett samhälle med måttlig VSH om fädernelinjerna inte har valts ut för egenskapen.

8. Ambinas roll

Arbetare som arbetar inne i boet står för merparten av hygienbeteendet. Mondet med flera fann att VSH-binas profil låg närmare ambinas än samlarbinas [8]. Det stämmer överens med samhällets biologi: arbetare med uppgifter inne i boet har störst möjlighet att komma i kontakt med täckt yngel.

I aveln bör man därför betrakta samhället som ett socialt system där det enskilda biet ingår som en del.

9. Mätning av hygienbeteende med nåltest

Nåltestet är en enkel metod för en första bedömning av hygienbeteendet. Välj ett område med täckt yngel av samma ålder och skada pupporna mekaniskt med en nål. Använd helst ett standardiserat antal celler, exempelvis 50–100. Räkna vid bestämda tidpunkter, vanligen efter:

• 12 timmar;

• 24 timmar;

• 48 timmar vid behov.

Exempel på bedömning av hygienbeteende med artificiellt skadat yngel. Andelen tömda celler registreras med standardiserade intervall

Utöver den slutliga andelen är borttagningshastigheten viktig. Ett samhälle som tömmer 95 % av cellerna på 12 timmar skiljer sig från ett som når samma resultat efter 48 timmar. Nåltestet passar därför särskilt bra för:

• inledande screening;

• snabbt urval;

• jämförelser inom samma bigård.

En slutlig genetisk bedömning bör även bygga på andra underlag.

10. Test med frysdödat yngel

Testet med frysdödat yngel (FKB) är lättare att standardisera. En del av ynglet fryses och återförs sedan till samhället. Därefter mäter man andelen celler som bina har tömt.

Facchini med flera jämförde det vanliga FKB-testet med en förkortad variant, FKB* [11]. År 2016 jämfördes metoderna i 25 samhällen. I det efterföljande avelsprogrammet fenotypades 56 samhällen år 2017 och 95 år 2018, med två mätningar per samhälle [11].

Korrelationen mellan de skattade samhällseffekterna för de båda metoderna var: r = 0,93

Arvbarheten skattad från en enda mätning var: h² = 0,23 och steg när medelvärdet av två mätningar användes: h² = 0,37.[11]

Den praktiska följden är:

upprepade test förbättrar den genetiska bedömningens tillförlitlighet

I yrkesmässig avel är det därför bättre att bedöma hygienbeteendet två gånger.

11. Vad betyder en arvbarhet på 23 eller 37 procent?

En vanlig feltolkning är:

”En egenskap med h² = 0,37 ärvs till 37 %.”

Arvbarhet i snäv mening uttrycks som h² = Vₐ/Vₚ. Den anger den andel av den fenotypiska variansen som kan tillskrivas additiv genetisk varians i den undersökta populationen och under de aktuella försöksförhållandena. Måttet beskriver variation inom en population.

Det förväntade urvalssvaret kan uppskattas som R = h²S, där S är urvalsdifferentialen.

Urval av individer som ligger klart över populationsmedelvärdet kan därför förbättra nästa generations genomsnittliga avelsvärde om egenskapen har tillräcklig arvbarhet.

12. Arvbarhet för ekonomiskt viktiga egenskaper

Ett exempel från yrkesbiodlingen är Maucourt med fleras kanadensiska avelsprogram, som omfattade 604 samhällen över åtta generationer [2]. De publicerade skattningarna var:

Egenskap	Skattat h²
Angrepp av Varroa	0,44 ± 0,56
Vårutveckling	0,30 ± 0,14
Honungsproduktion	0,20 ± 0,13
Hygienbeteende	0,18 ± 0,13
Vinterförbrukning av foder	0,11 ± 0,09

Flera skattningar är behäftade med stor osäkerhet. Värdet 0,44 för angrepp av Varroa gäller den undersökta populationen och de förhållanden som rådde. Studiens huvudsakliga bidrag var att visa att:

1. egenskaperna kan svara på genetiskt urval;

2. flera egenskaper kan väljas samtidigt;

3. ett avelsindex med flera egenskaper går att använda i praktiken [2].

4. 
   

13. Ta med honungsskörden i avelsindexet

Ett avelsprogram för VSH behöver beakta både avkastning och överlevnad. I yrkesbiodlingen är ett viktigt ekonomiskt mått honungsskörd per samhälle. I det kanadensiska programmet skattades arvbarheten för honungsproduktionen till ungefär: h² = 0,20 ± 0,13.[2]

Skattningen tyder på att honungsproduktionen kan svara på urval, men den påverkas också starkt av:

• miljöförhållanden;

• nektartillgång;

• klimat;

• samhällets styrka;

• skötsel;

• bigård;

• geografiskt läge.

Bedömningen bör därför omfatta flera år och helst flera miljöer.

14. Resultat från 366 samhällen: Pol-line

Studien av Pol-line är särskilt relevant eftersom den undersökte samhällen under förhållanden som liknar yrkesbiodlingens.

O’Shea-Wheller med flera undersökte 366 samhällen:

• 193 samhällen från kommersiella bestånd;

• 173 Pol-line-samhällen.

Samhällena hölls i Langstrothkupor med tio ramar och följdes över tid [1]. Överlevnaden var 59,884 % bland Pol-line-samhällena jämfört med 26,042 % bland de kommersiella samhällena. Risken att dö var signifikant lägre bland Pol-line-samhällena. Vid jämförelse av honungsskörden från 141 kommersiella samhällen och 137 Pol-line-samhällen fann man ingen statistiskt signifikant skillnad [1].

För yrkesbiodlingen ger dessa uppgifter ett större och mer produktionsnära underlag än ett försök med några få avläggare. Resultaten stöder slutsatsen:

en population som valts för varroaresistens kan bibehålla en konkurrenskraftig honungsskörd.

15. Resultat från 268 samhällen i Langstrothkupor

En annan studie av Kefuss med flera inleddes 1999 med 268 kommersiella samhällen i djupa Langstrothkupor av standardtyp för honungsproduktion och drottningodling [12]. Samhällena kom från kommersiella bestånd som omfattade A. m. ligustica, A. m. carnica, A. m. caucasica och A. m. mellifera. Behandlingen med akaricider upphörde och överlevnad blev ett urvalskriterium. Efter att mer än två tredjedelar av de ursprungliga samhällena hade gått förlorade bildade de överlevande grunden för en ny population. År 2013 omfattade programmet 519 obehandlade samhällen från de båda grupperna, med mycket låga kvalsternivåer [12].

Studien visar att det är möjligt att selektera en motståndskraftig population under kommersiella förhållanden. Försöksupplägget är viktigt för tolkningen: urvalet byggde främst på överlevnad utan behandling, och försöket utformades inte för att isolera effekten av VSH. Resultaten ger därför stöd för övergripande motståndskraft eller tolerans. De enskilda mekanismernas bidrag behöver fortfarande klarläggas.

16. Resultat från 604 samhällen över åtta generationer

Det kanadensiska programmet är ett annat exempel [2]. Det omfattade 604 samhällen fördelade på åtta generationer. När populationens storlek medgav det omfattade varje generation omkring 100 samhällen.

Varje år valdes ungefär 20 samhällen med bäst samlade resultat. Av dessa:

• användes 7–14 som modersamhällen;

• användes omkring 10 för drönarproduktion [2].

Programmet illustrerar övergången från urval efter enskilda fenotyper till avel på populationsnivå.

17. Resultat från 649 samhällen: ett stort urval med varierande samhällsstorlek

Gerdts med flera studerade 649 samhällen i nio biodlingsföretag och 21 bigårdar i Australien [13]. Det stora urvalet stärker skattningarnas robusthet. Samhällenas storlek varierade dock från avläggare på omkring fyra ramar till produktionssamhällen med bin på över 16 ramar. Variationen behöver beaktas.

Sexton procent av samhällena nådde tröskeln för starkt hygienbeteende, definierad som borttagning av minst 95 % av det döda ynglet [13]. Samhällen i avelsprogram var 5,8 gånger så benägna att visa starkt hygienbeteende. Hos samhällen vars drottningar härstammade från hygieniska mödrar var sannolikheten 2,2 gånger så hög [13]. Sambanden är förenliga med en ärftlig komponent som kan påverkas genom urval. Miljön kan också påverka hur egenskapen uttrycks.

18. Vad studier med små urval kan visa

Studier av några få samhällen kan vara viktiga för att:

• upptäcka en mekanism;

• identifiera en kandidatgen;

• utveckla en metod;

• visa ett orsakssamband;

• jämföra extrema fenotyper.

Svårigheten uppstår när sådana studier används för att uppskatta urvalssvaret i en kommersiell population. Harbo och Harris använde exempelvis 17 samhällen i sin studie av mekanismen bakom SMR, varav nio SMR-samhällen och åtta kontroller [10]. Försöket bidrog till att förklara mekanismen. Andra uppgifter krävs för att uppskatta hur vanlig egenskapen är i en kommersiell population.

Exempel på större studier:

• 155 samhällen i GWAS-studien om återförslutning [9];

• 268 samhällen i Kefuss med fleras kommersiella avelsförsök [12];

• 366 samhällen i jämförelsen med Pol-line [1];

• 604 samhällen i det kanadensiska programmet [2];

• 649 samhällen i den australiska studien [13].

Sådana studier kan ge bättre stöd för avelsbeslut på populationsnivå. Försöksupplägget spelar också roll: ett bristfälligt kontrollerat försök med 150 samhällen kan ge mindre information än ett försök med 40 samhällen och ett väl genomtänkt genetiskt upplägg.

19. Dadantkupor, Langstrothkupor och minikupor: betydelsen av samhällets storlek

För yrkesbiodlingen är det viktigt att skilja mellan:

• försökssamhällen;

• avläggare;

• minikupor;

• produktionssamhällen.

Samhällets storlek påverkar:

• mängden yngel;

• antalet ambin;

• temperaturen i boet;

• hur ofta bina interagerar;

• tillgången på resurser;

• angreppstrycket från Varroa;

• hur sociala beteenden uttrycks.

Resultat från en avläggare kan inte utan vidare överföras till ett produktionssamhälle i en Dadant-Blatt- eller Langstrothkupa. Försök som ska vägleda ett kommersiellt avelsprogram bör därför främst genomföras med fullstora produktionssamhällen. Studierna av Pol-line och Kefuss med flera är relevanta eftersom de använde standardiserade Langstrothkupor och stora populationer [1,12].

20. En viktig begränsning hos testet med frysdödat yngel

FKB-testet mäter allmänt hygienbeteende. Ett samhälle som snabbt avlägsnar en fryst puppa kan reagera annorlunda på yngel angripet av kvalster. Spivak och Danka påpekade att borttagning av artificiellt dödat yngel inte alltid förutsäger motståndskraft mot enskilda smittämnen eller parasiter [14]. I den australiska studien visade 16 % av de 649 undersökta samhällena starkt hygienbeteende. Beteendet kunde dock inte signifikant förutsäga förekomsten eller svårighetsgraden av kalkyngel [13].

Resultatet förtydligar vad HYG mäter:

HYG speglar allmän social immunitet, medan VSH beskriver en mer specifik respons.

21. Årsplan för fenotypning

Ett professionellt avelsprogram bör fördela testerna över säsongen.

För norra och mellersta Italien är följande tidsplan ett exempel.

Period	Bedömningar
Februari–mars	Överlevnad, samhällsstyrka, foderförråd, drottningens status
Mars–april	Vårutveckling, foglighet, svärmning
April–maj	Nåltest eller FKB-test
Maj–juni	Andra HYG-bedömningen, utveckling, produktion
Juni–juli	VSH, Harbotest, varroakvalster i ynglet
Juli–augusti	Varroapopulationens tillväxt, produktion, samhällsstorlek
Augusti–september	Angrepp på vuxna bin, varroakvalster i ynglet, MNR
September–oktober	Total honungsskörd, invintring, hälsostatus
Höst–vinter	Dataanalys och val av avelssamhällen

Tidpunkterna bör anpassas till det lokala klimatet och fenologin. Det viktigaste att standardisera är det biologiska skede då jämförelsen görs.

22. Protokoll för nåltestet

För varje samhälle:

1. välj en kaka med täckt yngel av samma ålder;

2. avgränsa ett område på 50–100 celler;

3. stick varje puppa med en insektsnål;

4. anteckna det ursprungliga antalet celler;

5. fotografera området;

6. kontrollera efter 12 och 24 timmar;

7. registrera andelen öppnade celler och andelen celler där ynglet har avlägsnats var för sig.

För avelsurvalet bör resultatet efter 24 timmar registreras:

HYG₂₄ = (celler tömda inom 24 timmar ÷ ursprungligen behandlade celler) × 100

Registrera även den tidigare mätningen som ett mått på borttagningshastigheten:

HYG₁₂

Då går det att skilja samhällen som når samma slutresultat olika snabbt.

23. Protokoll för FKB-testet

Använd ett standardiserat område med yngel, helst med minst 100 bedömbara celler.

Efter infrysningen:

1. återför området till samhället;

2. fotografera det;

3. kontrollera efter 24 timmar;

4. registrera andelen avlägsnat yngel;

5. upprepa testet vid en annan tidpunkt på säsongen.

Borttagning av 95 % inom 24 timmar är ett möjligt gränsvärde. Gerdts med flera bedömde borttagningen efter 48 timmar [13].

24. Direkt VSH-test

Direkt mätning av VSH kräver yngel som angripits av Varroa.

Förfarandet går i huvudsak ut på att:

1. välja kakor med täckt yngel;

2. identifiera celler som innehåller Varroa;

3. registrera ett inledande prov;

4. låta ynglet vara kvar i samhället under en bestämd tid, oftast omkring en vecka;

5. kontrollera vilka celler som har öppnats eller tömts;

6. registrera förekomsten av kvalster;

7. jämföra angripna och oangripna celler.

Det avgörande är att angreppstrycket är tillräckligt. Att inga kvalster hittas i ett samhälle med mycket lågt angrepp räcker inte för att klassificera det som ett samhälle med hög VSH.

25. Harbotestet

Undersökning av täckt yngel för att bedöma fortplantningen hos Varroa destructor. Bedömning av avkomman hjälper till att skilja reproducerande kvalster från dem som inte förökar sig

Harbotestet bedömer fortplantningen hos Varroa i ynglet.

Täckta celler öppnas för att registrera:

• förekomst av ett moderkvalster;

• förekomst av ägg;

• förekomst av en hane;

• förekomst av döttrar;

• avkommans utvecklingsstadium;

• utebliven fortplantning.

Utvecklingsstadier hos Varroa destructor

Provet behöver vara så stort att det innehåller tillräckligt många angripna celler. Ett föreslaget riktmärke för ett professionellt avelsprogram är minst 100 bedömbara angripna celler, med ett större prov när kvalstren är få. En enkel räkning ger bara: antalet kvalster som hittats. Kvalstrens reproduktionsstatus behöver också klassificeras. Ett samhälle med få kvalster som alla förökar sig kan inte automatiskt rankas högre än ett samhälle med fler kvalster där en mycket stor andel inte förökar sig.

26. Tolka MNR tillsammans med VSH

Beräkna för varje samhälle:

MNR = (kvalster utan fortplantning ÷ samtliga bedömbara kvalster) × 100

och samtidigt:

VSH = (tömda angripna celler ÷ ursprungligen angripna celler) × 100

Båda måtten behövs för att skilja mellan:

• samhällen som avlägsnar mycket angripet yngel;

• samhällen där de kvarvarande kvalstren har låg fortplantningsframgång;

• samhällen med båda fenotyperna;

• samhällen där angreppet är lågt på grund av lågt angreppstryck.

  
  

27. Varroakvalster på vuxna bin och i yngel

Uppföljning av motståndskraften kräver fler mått än VSH. Registrera med jämna mellanrum:

• kvalster på vuxna bin;

• kvalster i ynglet;

• utvecklingen under säsongen;

• kvalsterpopulationens relativa tillväxt.

En enskild mätning säger lite om utvecklingen. Tillväxthastigheten är mer informativ:

r = ln(Nₜ/N₀) ÷ t

där N₀ är den ursprungliga angreppsnivån, Nₜ nivån efter ett bestämt intervall och t intervallets längd. I ett avelsprogram är ett samhälle som begränsar populationstillväxten hos Varroa under hela säsongen mer intressant än ett samhälle med ett enda mycket lågt mätvärde.

28. Miljöns betydelse

Miljöförhållanden påverkar hygienbeteende och VSH starkt. Bland de faktorer som bör registreras finns:

• nektartillgång;

• tillgång till proteinfoder;

• temperatur;

• nederbörd;

• årstid;

• samhällets styrka;

• yngelmängd;

• angreppstryck från Varroa;

• samtidiga sjukdomar;

• biodlarens skötselmetoder.

I den australiska studien påverkade nektartillgången hur hygienbeteendet uttrycktes [13]. För en rättvis genetisk jämförelse bör samhällena så långt som möjligt bedömas:

• i samma bigård;

• vid samma tidpunkt;

• med jämförbar styrka;

• under jämförbara foderförhållanden.

  
  

29. Ett avelsindex för yrkesbiodling

Ett index med en enda egenskap skulle vara: I = VSH.

Ett index med flera egenskaper kan se ut så här:

I = w₁VSH + w₂M + w₃D + w₄S + w₅H + w₆SW + w₇HYG

där:

• VSH = hygienrespons på yngel angripet av Varroa;

• M = honungsskörd;

• D = foglighet;

• S = vårutveckling;

• H = övervintring;

• SW = låg svärmbenägenhet;

• HYG = allmänt hygienbeteende.

Ett exempel på en första viktning är följande.

Egenskap	Exempelvikt
VSH, MNR och angrepp av Varroa	30 %
Honungsproduktion	25 %
Foglighet och lugn	15 %
Vårutveckling	10 %
Övervintring och livslängd	10 %
HYG	5 %
Låg svärmbenägenhet	5 %

Anpassa vikterna till verksamhetens faktiska kostnader och intäkter.

30. Foglighet som urvalskriterium

Foglighet har ekonomiskt värde i yrkesbiodlingen. Ett mycket försvarsbenäget samhälle ökar:

• arbetstiden;

• rökförbrukningen;

• arbetsmiljörisken;

• personalens stress;

• svårigheterna med skötseln;

• de indirekta kostnaderna.

Innan ett mycket försvarsbenäget samhälle med exceptionell VSH används i avel bör det bedömas mot ett obligatoriskt minimikrav för foglighet.

Samma princip gäller svärmbenägenhet.

31. Svärmbenägenhet som uteslutningskriterium

Låg svärmbenägenhet är särskilt viktig för yrkesbiodling. Att bara anteckna om samhället svärmade ger en ofullständig bild. Registrera hellre:

• antalet drottningceller;

• datum då de först dyker upp;

• antalet nödvändiga ingrepp;

• antalet svärmar;

• hur ofta svärmceller förekommer;

• den tillhörande produktionsförlusten.

Ett samhälle som upprepade gånger kräver svärmförebyggande åtgärder är mindre lönsamt, även om det har utmärkt VSH.

32. Mät honungsskörden direkt

Urvalet bör utgå från kilogram honung per samhälle

tillsammans med indirekta mått som:

• antalet besatta ramar;

• yngelytan;

• uppskattad samhällsstyrka.

Samhällsstyrkan är en mellanliggande egenskap. Det ekonomiska utfallet är honungsskörden. Produktionen bör därför mätas åtminstone under de viktigaste dragperioderna.

Ett avelsprogram för yrkesbiodling behöver fördela urvalstrycket över flera biologiska och ekonomiska egenskaper. Dit hör allmänt hygienbeteende och VSH, minskad kvalsterreproduktion, samhällsutveckling, honungsskörd, foglighet, svärmbenägenhet och övervintringsförmåga. Målet är en stabil genetisk balans mellan parasitresistens och samlat värde för biodlingen.

Urval för flera egenskaper hos Apis mellifera

Avel för varroaresistens bör omfatta de viktigaste ekonomiska egenskaperna. VSH, allmänt hygienbeteende, minskad kvalsterreproduktion och överlevnad är de främsta resistensrelaterade egenskaperna. Honungsskörd, samhällsutveckling, foglighet, låg svärmbenägenhet och övervintringsförmåga avgör linjens samlade värde för biodlaren. Målet är att förbättra kombinationen över generationerna.

33. Femårig avelsplan för varroaresistenta bin i yrkesbiodlingen

År 1 – Inledande kartläggning

Rekommenderad population: 100–200 samhällen.

Önskvärda förhållanden:

• standardkupor av typen Dadant-Blatt eller Langstroth;

• individuellt identifierade drottningar;

• inledande härstamningsuppgifter;

• jämförbara bigårdar;

• enhetlig skötsel.

Under det första året fastställs ett fenotypiskt utgångsläge innan ett starkt urvalstryck används. Registrera följande för varje samhälle:

• övervintring;

• samhällsstyrka;

• yngel;

• honungsskörd;

• foglighet;

• svärmbenägenhet;

• HYG;

• varroaangrepp;

• VSH eller resultat av Harbotestet när angreppstrycket medger det.

  
  

År 2 – Första urvalet

Avelsgruppen kan begränsas till 20–30 möjliga modersamhällen och 20–40 drönarproducerande samhällen. Urvalet görs i två steg.

Första urvalet

Uteslut samhällen som är:

• mycket försvarsbenägna;

• mycket svärmbenägna;

• lågproduktiva;

• sjuka;

• svaga;

• dåliga på att övervintra.

Andra urvalet

Bland de återstående samhällena väljs de med:

• höga HYG-värden;

• höga VSH-värden;

• hög MNR;

• långsam populationstillväxt hos Varroa.

På så sätt tas ett ekonomiskt svagt samhälle inte in i programmet enbart på grund av ett testresultat.

År 2–3 – Instrumentell insemination

Instrumentell insemination av en drottning av Apis mellifera. Kontroll över fädernas bidrag gör det möjligt att planera korsningar i ett avelsprogram

Instrumentell insemination gör det möjligt att styra fädernas bidrag. Två metoder är vanligast.

Insemination med en drönare

Sperman kommer från en enda drönare.

Fördelar:

• mycket exakt härstamning;

• god genetisk kontroll;

• användbart för att studera segregation;

• användbart för att fixera kombinationer av egenskaper.

Nackdelar:

• risk för inavel;

• starkt beroende av hur genetiskt representativ den valda drönaren är.

• 
  

Insemination med flera drönare

Sperman kommer från flera utvalda drönare.

Fördelar:

• större mångfald;

• lägre risk för inavel;

• robustare samhälle.

I en population för yrkesbiodling är det i allmänhet lämpligt att behålla en viss mångfald bland fädernelinjerna.

Urval av drönarproducerande samhällen

Avelsprogrammet behöver också omfatta fädernelinjerna. Drönarna bör komma från samhällen med:

• höga VSH-värden;

• höga HYG-värden;

• god produktivitet;

• foglighet;

• god hälsa;

• god överlevnad;

• låga angreppsnivåer.

Det kanadensiska programmet är ett exempel. Varje år valdes omkring 20 samhällen för avel, några för drottningproduktion och andra för drönarproduktion [2].

År 3 – Avkommebedömning

Bedömningen flyttas från modern till familjen. Odla tillräckligt många dotterdrottningar från varje mor för att kunna bedöma familjen. Frågan går från

”Hur hög VSH har den här drottningen?”

till

”Hur hög VSH har hennes avkomma i genomsnitt, och hur stabil är egenskapen?”

Egenskapens uttryck kan minska i senare generationer. En exceptionell mor ger i sig begränsad information om linjens stabilitet.

År 3–4 – Familjeurval

Beräkna för varje familj:

• genomsnittligt VSH-värde;

• standardavvikelse;

• genomsnittligt HYG-värde;

• genomsnittlig angreppsnivå;

• genomsnittlig avkastning;

• genomsnittlig foglighet;

• svärmbenägenhet;

• övervintringsförmåga.

En familj med mindre extrema men jämnare resultat kan ha högre avelsvärde än en familj med ett enda exceptionellt samhälle. Principen är:

familjens avelsvärde ≠ bästa enskilda fenotyp

År 4 – Försök under produktionsförhållanden

Testa de bästa linjerna:

• i Dadant-Blattkupor;

• i Langstrothkupor;

• i produktionsbigårdar;

• under verkliga dragperioder;

• vid flyttbiodling där det är aktuellt.

Jämför åtminstone:

• honungsskörd;

• samhällsstyrka;

• svärmning;

• foglighet;

• varroaangrepp;

• övervintring;

• dödlighet;

• drottningens livslängd.

I det här skedet avgörs om linjerna har tillräckligt ekonomiskt värde för att användas i produktionen.

År 5 – Konsolidering

Under det femte året bör programmet kunna identifiera:

• 10–15 huvudsakliga mödernefamiljer;

• 20–40 fädernefamiljer;

• ett stort antal testade dotterdrottningar.

Målet är att bygga upp en genetiskt motståndskraftig population med tillräcklig mångfald. Genetisk mångfald är särskilt viktig hos honungsbin på grund av komplementär könsbestämning, där genen csd medverkar. Hårt urval inom ett fåtal linjer kan öka inavelsrisken och minska den samlade biologiska lämpligheten.

34. Det naturliga urvalets roll

Ett yrkesmässigt avelsprogram kan kombinera artificiellt urval med kontrollerat naturligt urval. Kefuss med flera beskriver en metod där överlevnad i närvaro av Varroa fungerade som ett första urval. Bland de överlevande samhällena gjordes sedan urval även efter ekonomiska egenskaper [12]. Metoden kan ge ett starkt urvalstryck, men till priset av hög dödlighet. I yrkesbiodling kan det vara nödvändigt att begränsa de inledande samhällsförlusterna.

En försiktigare strategi kombinerar:

• övervakning av varroaangrepp;

• VSH-testning;

• MNR;

• HYG;

• överlevnad;

• honungsskörd;

som gemensamma kriterier.

35. Avel och behandling med akaricider

Ett professionellt avelsprogram behöver bestämma hur svårt angripna samhällen ska hanteras och skilja mellan avelsbigården och produktionsbigården.

I avelsbigården kan förutbestämda försöksgränser och godkända protokoll tillämpas. I produktionsbigården prioriteras samhällenas skydd och hälsa. Om populationen av Varroa växer okontrollerat i ett avelssamhälle ska man ingripa enligt gällande protokoll.

Urvalet ska förbättra populationens biologiska lämplighet och begränsa förluster som kan undvikas.

36. Uteslutningskriterier

Uteslut ett tänkbart avelssamhälle vid:

• försvarsbeteende som är oförenligt med yrkesbiodling;

• återkommande svärmning;

• låg honungsskörd;

• dålig övervintring;

• hög sjukdomskänslighet;

• påtagligt ojämnt yngelmönster;

• snabb populationstillväxt hos Varroa;

• avvikande beteende hos drottningen.

Ett högt VSH-värde bör inte uppväga allvarliga problem med produktionen eller skötseln.

37. Föreslagen urvalsmetod

En praktisk metod kombinerar minimikrav med ett avelsindex.

Första urvalet

Samhället behöver uppfylla minimikraven för motståndskraft:

• lågt angrepp;

• långsam populationstillväxt hos Varroa;

• HYG över en fastställd gräns;

• VSH eller MNR över en fastställd gräns.

Andra steget

Bland de samhällen som klarar gränserna, välj efter:

• högre honungsskörd;

• bättre foglighet;

• lägre svärmbenägenhet;

• bättre utveckling;

• bättre övervintring.

Kort sagt: avelsmaterial = uppfyllda minimikrav på motståndskraft + högsta ekonomiska värde

Metoden anpassar avelsurvalet till yrkesbiodlingens praktiska behov.

38. Vilka studier bör väga tyngst i avelsbeslut?

Pol-line-samhällen från amerikanska avelsprogram för varroaresistens. Pol-line illustrerar urval under yrkesmässiga förhållanden

För att utforma ett kommersiellt avelsprogram kan forskningsunderlaget rangordnas enligt följande:

Första nivån

Studier med:

• minst 100 samhällen;

• produktionssamhällen;

• standardkupor;

• dokumenterad härstamning;

• flera generationer;

• upprepade mätningar.

Exempel är:

604 samhällen över åtta generationer – Maucourt med flera.[2]

366 samhällen i Langstrothkupor – Pol-line.[1]

268 samhällen i Langstrothkupor – Kefuss med flera.[12]

649 samhällen – den australiska studien.[13]

155 samhällen – genomvid associationsstudie om återförslutning.[9]

Andra nivån

Genetiska och mekanistiska studier med mindre urval och noggrant kontrollerade försök:

• Tsuruda med flera;

• Harbo och Harris;

• Mondet med flera;

• Oxley med flera.

Tredje nivån

Studier med:

• avläggare;

• minikupor;

• färre än 30 samhällen;

• endast en säsong.

Sådana studier är främst utforskande.

39. Höga arvbarhetsskattningar från små urval

Med små urval kan en hög h²-skattning ha ett stort standardfel. En skattning av h² = 0,65 från ett litet försök kan vara mindre tillförlitlig än en skattning av h² = 0,20 från hundratals samhällen över flera generationer. Ange tillsammans med skattningen:

• urvalets storlek;

• standardfel;

• härstamningsstruktur;

• miljö;

• statistisk modell.

  
  

40. Följ resultaten över tid

En enstaka mätning ger begränsad information:

VSH år 2026 = 80 %.

En mer användbar uppföljning skulle vara:

VSH år 2026 = 80 %, VSH år 2027 = 76 %, VSH i dottersamhällen = 74 %, låga varroaangrepp på hösten, honungsskörd över genomsnittet och god foglighet.

Avelsvärdet bedöms bättre genom att undersöka fenotypens stabilitet över tid. Det femåriga programmet bör därför utformas som en longitudinell studie.

41. Förslag till avelsjournal för varje samhälle

Ge varje samhälle en permanent beteckning.

Identifikation

• samhällets beteckning;

• drottningens beteckning;

• drottningens födelseår;

• mor;

• ursprung på fädernet;

• bigård;

• kupa.

Hälsa

• varroaangrepp i maj;

• varroaangrepp i juli;

• varroaangrepp i augusti eller september;

• MNR;

• VSH;

• HYG.

Produktion

• vårens honungsskörd;

• sommarens honungsskörd;

• total honungsskörd.

Samhällets biologi

• antal vuxna bin;

• yngel;

• samhällsutveckling;

• övervintring.

Beteende

• foglighet;

• lugn;

• svärmbenägenhet;

• benägenhet att röva andra samhällen.

Med tiden blir dessa uppgifter mer informativa än enstaka testresultat.

42. Slutlig beslutsmodell

Ett tänkbart avelssamhälle kan få ett standardiserat värde mellan 0 och 100 för varje egenskap. Till exempel:

Egenskap	Poäng
VSH	90
MNR	85
HYG	88
Honungsskörd	92
Foglighet	95
Samhällsutveckling	90
Övervintring	87
Låg svärmbenägenhet	91

Det sammanlagda indexet kan sedan beräknas så här:

I = 0,30 × VSH + 0,25 × honungsskörd + 0,15 × foglighet + 0,10 × utveckling + 0,10 × övervintring + 0,05 × HYG + 0,05 × låg svärmbenägenhet

Det är särskilt viktigt att fastställa minimigränser.

Till exempel:

• VSH under gränsen → uteslutning;

• foglighet under gränsen → uteslutning;

• honungsskörd under gränsen → uteslutning.

Då kan ett exceptionellt resultat för en egenskap inte dölja en allvarlig brist för kommersiell produktion.

43. Slutsatser

Den tillgängliga forskningen stöder slutsatsen att motståndskraften hos Apis mellifera mot Varroa destructor är en komplex och ärftlig egenskap som kan förbättras genom urval.

VSH är en av flera mekanismer som bidrar till den samlade motståndskraften. Helheten omfattar:

allmänt hygienbeteende, VSH, MNR eller SMR, återförslutning av celler, putsbeteende, yngeldynamik, samhällets respons och överlevnad.

Egenskapen har en polygen grund. De QTL som identifierats av Tsuruda, Lapidge, Oxley och deras kollegor visar att variationen i beteendet är kopplad till flera genomregioner [5–7]. Molekylära studier av antennerna tyder även på att luktsinnet och det perifera nervsystemet har en viktig roll för hur VSH uttrycks [8].

Samhällets sociala struktur spelar också roll. Ett samhälle består av samarbetande arbetare från olika fädernelinjer. Avelsprogram behöver därför välja både möderne- och fädernelinjer samt bedöma avkomman.

Arvbarhetsskattningar behöver tolkas i sitt sammanhang. I Facchini med fleras italienska studie var den skattade arvbarheten 0,23 för en enskild HYG-mätning och 0,37 för genomsnittet av två mätningar [11]. I det kanadensiska programmet med 604 samhällen hade angrepp av Varroa, vårutveckling, honungsskörd, vinterförbrukning och HYG alla en genetisk komponent som kan påverkas genom urval [2].

Storskaliga studier är särskilt relevanta. I Pol-line-studien med 366 samhällen i Langstrothkupor med tio ramar var överlevnaden omkring 60 %, jämfört med 26 % i det kommersiella beståndet. Honungsskörden skilde sig inte signifikant mellan de överlevande samhällen som bedömdes [1]. Kefuss med flera började med 268 kommersiella samhällen i Langstrothkupor, och programmet omfattade senare 519 obehandlade samhällen. Resultaten visar att urval under kommersiella förhållanden kan ge populationer med låga nivåer av Varroa [12].

Resultaten är relevanta för yrkesmässig avel eftersom de går utöver försök med avläggare eller ett fåtal tiotal samhällen. Den viktigaste frågan gäller vilka samhällen som väljs till avel.

Ett högt VSH-värde är ett av flera kriterier. Välj samhällen med:

• tillräcklig VSH;

• långsam populationstillväxt hos Varroa;

• starkt hygienbeteende;

• hög andel kvalster som inte förökar sig;

• hög honungsskörd;

• foglighet;

• lugn på kakan;

• låg svärmbenägenhet;

• god vårutveckling;

• god övervintring;

• långlivad drottning;

• god allmän hälsa.

Avelsmålet kombinerar:

varroaresistens + produktion + enkel skötsel + biologisk lämplighet

med hänsyn till:

VSH som en del av motståndskraften

I yrkesbiodling är VSH mest användbart som en del av urvalet för flera egenskaper.

Ett femårigt program som börjar med 100–200 samhällen ger bättre stöd för avelsurvalet om det omfattar upprepad fenotypning, härstamningsuppgifter, urval av möderne- och fädernefamiljer, instrumentell insemination, bedömning av dottersamhällen och försök under normala produktionsförhållanden.

Det slutliga målet är att bygga upp en stabil, produktiv och foglig population för yrkesbiodling med gradvis större motståndskraft mot Varroa destructor.

Avslutande metodanmärkning

De arvbarhetsskattningar som anges här beskriver variationen inom de undersökta populationerna. De beror på population, härstamning, miljö, mätmetod, årstid och statistisk modell. Praktiska gränsvärden för HYG och VSH är urvalsverktyg och kan variera med protokollet. Ett italienskt avelsprogram skulle kunna använda publicerade skattningar som inledande förhandsinformation och successivt ersätta dem efter tre till fem generationer med genetiska parametrar från den egna populationen. För individuella journaler för varje samhälle och drottning, inklusive möderne- och fädernelinjer. En VSH-linje bedöms bäst över tid och hos dess avkomma. Sök efter långsam populationstillväxt hos Varroa och tillräcklig överlevnad samtidigt som honungsskörd, foglighet, utveckling och jämn produktion bibehålls.

Referenser

[1] O’Shea-Wheller, T. A., Rinkevich, F. D., Danka, R. G., Simone-Finstrom, M., et al. (2022). A derived honey bee stock confers resistance to Varroa destructor and associated viral transmission. Scientific Reports, 12, 4852. DOI: 10.1038/s41598-022-08643-w. (PubMed Central (PMC))

[2] Maucourt, S., Fortin, F., Robert, C., & Giovenazzo, P. (2020). Genetic Parameters of Honey Bee Colonies Traits in a Canadian Selection Program. Insects, 11(9), 587. DOI: 10.3390/insects11090587. (PubMed Central (PMC))

[3] Noël, A., Le Conte, Y., & Mondet, F. (2020). Varroa destructor: how does it harm Apis mellifera honey bees and what can be done about it? Emerging Topics in Life Sciences, 4, 45–57. DOI: 10.1042/ETLS20190125. (PubMed Central (PMC))

[4] Mondet, F., Beaurepaire, A., McAfee, A., Locke, B., Alaux, C., Blanchard, S., Danka, B., & Le Conte, Y. (2020). Honey bee survival mechanisms against the parasite Varroa destructor: a systematic review of phenotypic and genomic research efforts. International Journal for Parasitology, 50, 433–447. DOI: 10.1016/j.ijpara.2020.03.005. (PubMed Central (PMC))

[5] Lapidge, K. L., Oldroyd, B. P., & Spivak, M. (2002). Seven suggestive quantitative trait loci influence hygienic behavior of honey bees. Naturwissenschaften, 89, 565–568. DOI: 10.1007/s00114-002-0371-6.

[6] Oxley, P. R., Spivak, M., & Oldroyd, B. P. (2010). Six quantitative trait loci influence task thresholds for hygienic behaviour in honeybees (Apis mellifera). Molecular Ecology, 19, 1452–1461. DOI: 10.1111/j.1365-294X.2010.04569.x.

[7] Tsuruda, J. M., Harris, J. W., Bourgeois, L., Danka, R. G., & Hunt, G. J. (2012). High-Resolution Linkage Analyses to Identify Genes That Influence Varroa Sensitive Hygiene Behavior in Honey Bees. PLoS ONE, 7(11), e48276. DOI: 10.1371/journal.pone.0048276. (PubMed Central (PMC))

[8] Mondet, F., Alaux, C., Severac, D., Rohmer, M., Mercer, A. R., & Le Conte, Y. (2015). Antennae hold a key to Varroa-sensitive hygiene behaviour in honey bees. Scientific Reports, 5, 10454. DOI: 10.1038/srep10454. (PubMed)

[9] Guichard, M., et al. (2022). Two quantitative trait loci are associated with recapping of Varroa destructor-infested brood cells in Apis mellifera mellifera. Animal Genetics, 53, 156–160. DOI: 10.1111/age.13150. Genomvid associationsstudie av 155 samhällen. (PubMed)

[10] Harbo, J. R., & Harris, J. W. (2005). Suppressed mite reproduction explained by the behaviour of adult bees. Journal of Apicultural Research, 44(1), 21–23. DOI: 10.1080/00218839.2005.11101141. (ARS USDA)

[11] Facchini, E., Bijma, P., Pagnacco, G., Rizzi, R., & Brascamp, E. W. (2019). Hygienic behaviour in honeybees: a comparison of two recording methods and estimation of genetic parameters. Apidologie, 50, 163–172. DOI: 10.1007/s13592-018-0627-6. (Springer Nature)

[12] Kefuss, J., Vanpoucke, J., Bolt, M., & Kefuss, C. (2016). Selection for resistance to Varroa destructor under commercial beekeeping conditions. Journal of Apicultural Research, 54(5). DOI: 10.1080/00218839.2016.1160709. (Taylor & Francis Online)

[13] Gerdts, J., Dewar, R. L., Simone-Finstrom, M., Edwards, T., & Angove, M. (2018). Hygienic behaviour selection via freeze-killed honey bee brood not associated with chalkbrood resistance in eastern Australia. PLoS ONE. Studie av 649 samhällen. (PubMed Central (PMC))

[14] Spivak, M., & Danka, R. G. (2021). Perspectives on hygienic behavior in Apis mellifera and other social insects. Apidologie, 52, 1–16. (Springer Nature)

[15] Mondet, F., Parejo, M., Meixner, M. D., et al. (2020). Evaluation of Suppressed Mite Reproduction (SMR) Reveals Potential for Varroa Resistance in European Honey Bees (Apis mellifera L.). Insects, 11(9), 595. (PubMed Central (PMC))

[16] Bigio, G., Al Toufailia, H., & Ratnieks, F. L. W. (2014). Honey bee hygienic behaviour does not incur a cost via removal of healthy brood. Journal of Evolutionary Biology, 27, 226–230. DOI: 10.1111/jeb.12288.

Författare: Davide Simeone

Publicerad 20 augusti 2026